新冠核酸检测是怎么测问
新冠核酸检测是怎么测
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新冠核酸检测是通过聚合酶链式反应(PCR)技术,对新冠病毒特有的核酸序列进行扩增和检测,以判断受检者是否感染新冠病毒。其核心原理是基于病毒RNA的逆转录和特异性扩增,通过荧光信号量化病毒核酸存在情况。
一、检测原理:新冠病毒为RNA病毒,核酸检测需先将病毒RNA逆转录为cDNA,再通过PCR技术特异性扩增病毒特有的保守基因片段(如ORF1ab、N、S基因)。扩增过程中加入荧光探针,随着扩增循环数增加,荧光信号积累到阈值(Ct值)时,即可判定为阳性。
二、样本采集方式:临床常用样本包括鼻咽拭子、口咽拭子、痰液等。鼻咽拭子通过专用拭子深入鼻腔(成人约2-3cm,儿童1-1.5cm),旋转擦拭鼻腔后部黏膜;口咽拭子让受检者张口发“啊”音,拭子擦拭双侧咽后壁及扁桃体;痰液样本需受检者深咳排出痰液,避免混入唾液。所有样本采集后需立即放入含胍盐等成分的病毒保存液中,防止RNA降解。
三、检测流程:样本首先进行灭活处理(如使用蛋白酶K消化病毒蛋白),随后通过磁珠法或柱提法提取核酸;提取的核酸与PCR反应体系(含引物、探针、dNTP、Taq酶等)混合,在PCR仪中完成变性(95℃)、退火(55-65℃)、延伸(72℃)循环(一般35-45个循环);通过实时荧光监测系统分析每个循环的荧光信号,根据Ct值判断结果(Ct≤35为阳性,Ct>40为阴性,35~40为灰区需复检)。
四、特殊人群注意事项:儿童(尤其婴幼儿)采集时需家长固定头部,选择细头拭子(成人用2mm,儿童1.5mm),采样后安抚情绪;老年人若鼻腔狭窄或黏膜脆弱,可提前用生理盐水湿润鼻腔,操作中避免用力过猛;孕妇建议由产科医生评估,采样前告知既往流产史或胎盘异常史;有凝血功能障碍(如血小板减少)者,采样后需压迫止血5-10分钟,避免出血不止。
五、结果意义与局限性:阳性结果提示病毒核酸存在,需结合临床症状(如发热、咳嗽)进一步诊断;阴性结果不能完全排除感染,尤其采样量不足(如口咽拭子替代鼻咽拭子)或感染早期病毒载量低时可能出现假阴性。若检测后仍有疑似症状,建议间隔24-48小时复检或采用抗原检测辅助判断。
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